1

微液滴数字PCR仪

(国产)

1、工作环境

1.1环境温度要求：10-30℃

1.2环境湿度要求：相对湿度<70%

2、应用范围

将反应体系分成数万个油包水的微液滴，在独立的反应体系（微液滴）中进行PCR扩增，最后根据阳性微液滴个数与比例直接得出靶分子的起始拷贝数或浓度。主要应用领域有：拷贝数变异、稀有突变检测、基因相对表达研究、转基因检测、二代测序结果验证、肿瘤液体活检、无创产前诊断、病原微生物检测、靶向测序、新冠病毒高敏检测等。

3、性能与技术要求

3.1仪器采用压力动力产生油包水微液滴，压力装置与仪器一体化集成设计无需外接任何外源性气源及空气压缩机，便于实验室布置和维护管理

3.2实验体系：可在20-50µL范围内调节，根据样本类型灵活调整上样量

3.3微滴制备可处理1-8个样品

3.4微滴生成丰度：30 µL体系可检测有效微滴数量：≥40000个，50 µL体系可检测有效微滴数量：≥70000个

3.5样品放入液滴制备仪后全程无需人工移取液滴，微滴生成后无需封膜操作，避免样品间交叉污染

3.6微滴生成速度：≤5分钟/8样本

3.7微滴尺寸差异：≤1%

3.8单次同时扩增通量：1—96样本

PCR扩增支持温度梯度优化功能，便于摸索实验条件

3.10检测方式：流式共聚焦微滴计数分析（提供文献证明）

3.11光源：固态三激光器

3.12检测器：高灵敏度PMT检测器，量子效率>50%，无需掺入额外本底荧光即可识别阴性液滴

3.13微滴分析仪至少具有FAM、VIC/HEX、ROX、Cy5、Cy5.5/Q705五个检测通道，数据结果包括一维图、二维图、三维图和统计直方图，支持多指标和Drop-off分析功能

3.14可实现FAM、VIC/HEX、ROX、Cy5、Cy5.5/Q705五通道荧光无差异并行检测，兼容EvaGreen

3.15检测过程封闭体系设计，确保PCR产物不暴露在空气中，减少气溶胶污染和样品损失

3.16每样本微滴检测速度：≤4分钟/样本

3.17不依赖标准曲线，实现核酸绝对定量

3.18检测灵敏度：0.01%，能检测到单拷贝基因

3.19动态范围：5个数量级，1~300000 copies/sample

3.20精确度：CV小于等于10％

3.21支持微滴样品回收功能

3.32仪器具有医疗器械注册证

4、必备附件

4.1制备仪电脑：Intel(R)Core(TM) I7-11800H；CPU主频：1.60 GHz；系统内存：128GB；硬盘SSD、512GB，；缓存：三级缓存：6 MB；64位Windows10

4.2分析仪电脑：Intel(R)Core(TM) I7-11800H；CPU主频：1.60 GHz；系统内存：128GB；硬盘SSD、512GB；缓存：三级缓存：6   MB；64位Windows10

4.3分析仪控制分析软件：分析软件可同时对多批次数据自由组合分析，计算变异系数、线性度、置信区间等，可编辑公式对数据进行二次分析，可自动绘图；可预设检测项目及其判读标准，软件自动判读检测结果，并可根据客户需要生成和打印医学检测报告，报告格式可定制；分析软件可根据客户需求定制

4.4   PCR扩增仪：

a)高清真彩全触摸屏，曲线图形实时显示程序。

b)   样品台容量: 96孔*0.2ml

c）最大变温速度：6℃/秒

d)   全新Top-Open开合热盖技术，热盖自动关闭功能；热盖温度：30℃～112℃可调。

e）样品台温度范围：0℃～105℃；梯度范围：30℃～99.9℃；

样品台温度均匀性：≤±0.2℃(95℃时)；样品台温度准确性： ≤±0.1℃。

f)   主机可储存15，000个以上PCR标准程序, 可通过U盘无限量下载程序或升级软件。

4.5   数据服务器：CPU：i9 9900KF；内存：16GB   DDR4 3200MHz（2条），固态存储：NVMe   M.2 250GB；主板：MAG Z390M MORTAR；硬盘：1TB 7200转 64MB SATA3；显卡：GTX 1650 SUPER OC 4G；移动固态储存器2TB；鼠标：M590轻音鼠标；键盘：MX2.0S G80-3820LXAEU-0，全尺寸。预装控制分析软件一套，分析软件可同时对多批次数据自由组合分析，计算变异系数、线性度、置信区间等，可编辑公式对数据进行二次分析，可自动绘图；可预设检测项目及其判读标准，软件自动判读检测结果，并可根据客户需要生成和打印医学检测报告，报告格式可定制；分析软件可根据客户需求定制

5、配置清单

5.1样本制备仪 1台

5.2生物芯片分析仪   1台

5.3   PCR扩增仪1台

5.4数据服务器 1套

5.5装机验证试剂盒1套

5.6相关检测试剂盒（数字PCR法）500测试

5.7 DNA模板通用试剂耗材（样本制备通用试剂盒、微液滴检测通用试剂盒、微液滴数字PCR反应预混液）500测试

5.8   Eppendorf移液器（0.5-10ul 、2-20ul、20-200ul、100-1000ul）可高压灭菌1套

5.9   Eppendorf电动移液器  1把

5.10彩色激光打印机（佳能/canonMF641cw彩色激光无线双面打印机复印扫描传真一体机）1台

5.11数据服务器1套

5.12制备仪电脑1台

5.13分析仪电脑1台

6、质量保证期：经用户验收合格起质量保证期叁年，质保期内提供免费软硬件升级

1台

2

微液滴数字数字PCR仪（进口）

1、用途

1.1使用数字PCR进行直接计数目标基因和参照基因的双重反应，通过计算比值，便可直接得到目标基因的拷贝数。

1.2数字PCR 是一种不需要标准曲线并且对部分抑制剂不灵敏的检出方法。因此，研究人员纷纷将其应用于一些病毒或致病菌的检测研究中，如 HBV、肠病毒、腺相关病毒、巨细胞病毒、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、结核分支杆菌、产志贺毒素大肠杆菌等。

1.3 数字PCR平台可以与 NGS 对接，实现对测序文库的质量控制、提供对测序文库的定量分析和质量评估信息。一方面，数字PCR 对 NGS 的测序结果进行验证，对诸如单核苷酸多态性，突变及拷贝数变异在内的基因组变异进行验证，确保测序结果的可信度；另一方面，所得到的结果还包含反映测序文库质量的信息，如接头与接头二聚体、错误连接片段、过长连接片段等，这是当前其他方法所不具备的优势。研究表明，数字PCR定量分析结果可靠性高、重复性好。

2、技术参数

2.1微滴生成模块

2.1.1微滴生成原理采用真空负压动力产生微滴，无需外接气体罐或空气压缩机, 方便实验室布置和维护管理。

2.1.2微滴生成模块工作原理微滴生成模块采用封闭式一体化工作站，具备自动移液功能。设备带有HEPA过滤系统，避免污染的可能性。单次可自动完成≥96个样本的微滴生成，96个样本处理时间≤30分钟。

2.1.3自动化通过大型彩色触摸屏界面和 LED 指示灯指导设置和装载，运行过程中无需人工干预。

2.1.4生成微滴均一性CV≤0.8%。

2.1.5微滴生成数量可选择将每个样品的反应体系分为20000个或100000个纳升级的油包水微滴。

2.1.6消耗品实时监控能力支持运行中消耗品实时更换。

2.2微滴扩增模块

2.2.1物理原理采用蜂巢式半导体温控模块，孔与孔之间完全连通，结合传统半导体温控模式与空气浴温控模式的优点。

2.2.2温度梯度功能不小于5.7英寸彩色触摸屏，具有动态温度梯度功能，可同时筛选≥8个不同退火温度，加快检测体系的优化和建立。

2.2.3温控范围0-100℃

2.2.4最高升降速度≥5℃/S

2.2.5温控均一性≤±0.4℃

2.2.6温控准确度≤±0.2℃

2.2.7可适配梯度PCR反应模块≥4种梯度PCR反应模块，包括单槽96×0.1模块、单槽96×0.2模块、单槽384模块及2x48x0.2ml模块等。

2.2.82x48x0.2ml模块当安装2x48x0.2ml模块时，可独立运行两个不同的程序，供两人同时使用

2.3微滴检测模块

2.3.1微滴检测原理微滴检测方式为流式微滴分析技术，微滴逐个通过检测器，被识别并读取荧光信号，无需额外加入参比荧光染料。系统支持EvaGreen 染料法以及探针法。

2.3.2光源类型LED

2.3.3检测器类型≥6个高灵敏多像素光子计数器，具备单光子分辨能力。

2.3.4样品体积≥20uL

2.3.5微滴检测模块通量1-96个样品/次。最大检测通量≥96个样品/次，可任意设置对照样品。

2.3.6微滴检测速度≥30样品/小时

2.3.7多重检测能力≥10重

2.3.8单个样本检测微滴总数96孔板≥150万。

2.3.9适用方法同时适用于染料法和探针法

2.3.10微滴内PCR产物回收须实现微滴内PCR产物回收，并提供相应的回收方案。

2.3.11灵敏度≤0.001%，能检测到单拷贝基因。

2.3.12动态范围不小于5个数量级，1-100,000。

2.3.13微滴质控系统采用专用传感器监控每个微滴的散射光信号，通过散射光产生的电子信号对微滴的体积及形态进行质控，计算平均微滴体积并剔除误差过大的不良微滴，从而达到对微滴进行质控的目的。微滴质控系统自动进行微滴质控，无需人工干预。

2.4分析软件

2.4.1数据安全软件符合21CFR part11对于数据安全的要求。

2.4.2软件功能能显示每个微滴FAM通道(或EvaGreen)和HEX(VIC)通道的荧光信号，计算给出每个样品中含有靶分子的起始拷贝数或浓度(copies/ul)、拷贝数变异、稀有突变百分比分度和连锁分析功能，结果可直接打印输出或导入Excel表格。

2.5试剂盒可提供原厂开发的检测试剂盒，包括突变检测、拷贝数变异分析、基因表达分析、基因编辑检测、NGS文库定量分析、突变多重检测试剂盒以及检测试剂盒库检索订购定制服务，并提供产品资料。

2.6系统可用性证明提供利用该品牌的数字PCR平台已发表的文献≥4400篇。

3、配置清单

3.1微滴生成模块1台

3.2微滴检测模块1台

3.3微滴扩增模块1台

3.4热封模块1台

3.5配套分析软件1套

3.6启动试剂及耗材1套

3.7移液器Eppendorf Research® plus单道手动移液器1套（含0.5-10,10-100,20-200,100-1000,1000-10000µL各一把）;Eppendorf Xplorer® 8道电动移液器1把：15-300µL

Eppendorf Easypet® 3 单道,电子移液控制器1把

3.8计算机工作站数量：两套                                              要求1：品牌：联想 GeekPro-17 一套

CPU i7-12700F 操作系统，windows11内存，16GB 硬盘512G， SSD+1T 7200转， 显卡 GTX1660SP 6G ，显示器 27寸，显示器分辨率：1920*1080

要求2：品牌笔记本电脑一套：

屏幕尺寸：14英寸，运行内存：DDR4 3200MHz、64GB，硬盘存储容量：SSD、512GB，CPU：i7-1165G7 处理器 、4核、基频2.8GHz，最高频率4.7GHz、8线程，显卡：英特尔锐炬 Xe显卡。

3.9打印机数量 1台 要求：

品牌：富士施乐M455df高速打印机

功能：黑白激光打印、复印、扫描

3.10备品备件检测试剂1000人份（包括：微滴发生卡、微滴生成油、预混液、96孔板、96孔封膜、微滴读取油等）。

4、质量保证期：

经用户验收合格起质量保证期叁年，质保期内提供免费软硬件升级。

1套

3

超低温冰箱（进口）

1有效容积≥728L

2箱体内中心温度控制范围（环境温度30℃时）：-50℃―86℃。

3净重≤346kg

4外型尺寸≤1010×870×2010（W×D×Hmm）

5内部尺寸≥870×600×1400（W×D×Hmm）

6外壳：镀锌钢板上烘烤丙烯酸罩面漆

7内壁：镀锌钢板上烘烤丙烯酸罩面漆（彩钢板）

8箱门：采用双层构造，1个带锁外门，2个隔热型内门，ABS内门设计，100%绝热外层门；门框采用电加热保护装置，保证门内冷气不受损失。

9温度控制：PID控制系统，设定温度（1℃梯度）。

10传感器：内置铂阻热敏PT100传感器，精确度高。

11声视报警系统（灯显示、蜂鸣器响），断续声15分钟：自动高低温报警；停电故障报警；过滤网检查报警；故障自我诊断；远程报警端子；开门报警；电池报警。

12额定功率≤1100W。

13真空隔热材料：多层独立的真空隔热板为开放框架，包覆无氟硬聚安酯发泡密闭隔热层，超薄的箱壁提供最高效的隔热效果和最大有效容积。

14高效密封式压缩机：2个独立压缩机组的级联式循环方式，级间热交换器，高效的气冷式高温极冷凝器，可清洗的冷凝器过滤网和降噪装置

15远程警报接口：有，可连接远程集中控制和报警系统。

16故障预警按钮：STATUS按钮,可在故障发生之前报警提示,例如环境温度过高,电源发生不稳时,压缩机工作效率降低时。

17箱体隔热材料采用VIP绝缘隔热材料，其结构坚固耐用，经过严密抽真空，隔热性更强。VIP绝缘隔热材料的寿命长达15~20年之久。

18可适合海拔高度在2000M地理范围，不受大气压力影响。

19环境温度范围在5℃~40℃。正常工作，安全可靠。

20实时工作状态监控，实时监控环境温度，如有异常，在主机仍正常工作情况下，发出警示。

21高超制冷技术和多重安全报警装置，确保精确的制冷环境和减少冷量流失，减少内门结霜。自动除霜。

22配置清单

主机、防滑设计单手门把手+锁扣、含全套冻存分隔架。

2台